Borik Asitin Anti-Proliferatif ve Anti-Apoptotik Etkilerinin İnsan Küçük Hücreli Dışı Akciğer Kanseri Hücrelerinde TGF-β Sinyal Yolağı Üzerinden İncelenmesi

Abstract

Amaç: Akciğer kanseri, tüm dünyada hem kadın hem de erkeklerde en sık görülen kanser türüdür. Son yıllarda kanser konusunda elde edilen bilimsel gelişmelere rağmen, bu patoloji hala yüksek mortalite oranları ile ilk sıralarda yer almaktadır. Akciğer kanseri olgularının %85’ini küçük hücreli olmayan akciğer kanseri oluşturmaktadır. Bu hastalarda hastalığın seyri oldukça kötü ilerlemekte ve tanısı çoğunlukla ileri evrelerde konulduğundan, çoğu hastada uygulanan tedaviler başarılı olamamaktadır. Borik asit (BA) sahip olduğu kimyasal özellikler, düşük yan etki oranları ve anti-kanserojen etkilere sahip esansiyel bir mikro elementtir. Bu çalışma kapsamında anti-proliferatif ve anti-apoptotik etkileri bilinen BA’nın, küçük hücreli dışı akciğer kanseri hücreleri (A549) üzerindeki sitotoksik, anti-proliferatif ve apoptotik etkilerinin TGF-β sinyal yolağı üzerinden araştırılması amaçlanmıştır. Yöntem: Çalışmada insan küçük hücreli dışı akciğer kanseri hücreleri (A549) kullanıldı. BA’nın sitotoksik analizi MTT analizi ile yapıldı. BA’nın apoptotik etkisi Annexin V/PI ve immünfloresan analizlerle belirlendi. TGF-β, SMAD2/3/4 genlerinin ekspresyon düzeyleri moleküler düzeyde kantitatif gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (RT-qPCR) ile analiz edildi. Her bir reaksiyon üç kez tekrarlandı. Bulgular: MTT analizi sonucu 50 mM BA’nın A549 hücrelerinde proliferasyonu azalttığı gözlendi (p<0.01). 50 mM BA uygulaması ile 48. saatte apoptotik hücre oranı %9.7’ye, erken apoptoz evresindeki hücre oranı ise %10.1’e yükseldi. İmmünfloresan analizinde de A549 hücrelerinde Kaspaz-3 işaretlenme düzeyininin kontrol grubuna göre yüksek miktarda olduğu gözlendi. BA uygulanan A549 hücrelerinde SMAD3 ve SMAD4 genlerinin ifadesinde anlamlı bir değişme gözlenmedi. TGF-β geninin ifadesinde azalma gözlenirken (p<0.05), SMAD2 gen ifadesinde artış gözlendi (p<0.01). Sonuç: Sonuçlar BA’nın; anti-proliferatif ve anti-apoptotik aktiviteye sahip yeni bir tedavi edici ajan olabileceğini göstermektedir. Ancak bu etkilere aracılık eden yolakların aydınlatılması için ileri düzeyde çalışmalara ihtiyaç bulunmaktadır.