Cultivo de células troncales de médula ósea de ratas para uso en regeneración de tejidos

Abstract

Antecedentes. Las células troncales se consideran un agente terapéutico prometedor en regeneración de tejidos. El uso de éstas requiere un proceso previo y riguroso de obtención y para su aplicación es esencial el uso de modelos animales. Objetivo: Obtener poblaciones de células troncales de médula ósea de ratas con la conservación en cultivo de las características de troncalidad. Métodos: Este fue un estudio experimental en el que se usaron ratas macho y hembras eutanasiadas del linaje Lewis. Se disecaron los huesos de las extremidades posteriores y, a partir de la médula ósea de estos, se obtuvieron los cultivos primarios a los cuales se les hizo la depleción de las poblaciones CD45+. Las poblaciones libres de CD45 se subcultivaron hasta el pasaje cinco y se evaluaron sus características morfológicas, inmunofenotípicas, de proliferación y la capacidad de diferenciación a tres linajes. Resultados: La evaluación morfológica de los cultivos mostró un predominio de células ahusadas y fibroblastoides que crecieron adheridos y en UFC-F. El inmunofenotipo se caracterizó por la expresión positiva de CD90, CD29 y CD146. Los cultivos inducidos a los linajes osteogénico, condrogénico y adipogénico mostraron un cambio en la morfología y positividad a las tinciones de Rojo de Alizarina, Azul Alcian y Aceite Rojo O, respectivamente. El aumento en la actividad de fosfatasa alcalina corroboró la diferenciación osteogénica en los subcultivos inducidos a este linaje. Conclusión: Se obtuvieron poblaciones de células troncales de médula ósea de ratas que conservaban las características de troncalidad y por lo tanto la posibilidad de usarlas en estudios preclínicos de regeneración de tejidos.